Rani Mukherjee urodziła się 21 marca 1978 w Bengalu (Indie). Pochodzi z bengalskiej rodziny o tradycjach filmowych. Jej ojciec Ram Mukherjee był reżyserem, jej matka Kriszna niegdyś pracował jako śpiewak playbacku. Jej brat Raja Mukherjee jest producentem filmowym. Jej matczyna ciotka, Debashree Roy, była popularną bengalską aktorką. A jej kuzynka Kajol jest jedną z najbardziej znanych bollywodzkich aktorek. Jej kuzyn Sharbani Mukherjee jest również aktorem.

Ukończyła Maneckjee Cooper liceum w Juhu, a później zapisała się na Mithibai College w Bombaju.

Zadebiutowała w 1996 roku w filmie "Raja Ki Aayegi Baraa", który jednak nie odniósł sukcesu. Jednakże, jej następne dwa filmy – „Ghulam” i „Kuch Kuch Hota Hai” (1998) były wielkimi hitami. A za film Kuch Kuch Hota Hai (1998) dostała swoją pierwszą statuetkę Filmfare Award dla najlepszej aktorki drugoplanowej. Potem zagrała w kilku filmach nie odnoszących sukcesu. W 2001 roku dostała małą rolę w mega produkcji "Czasem słońce, czasem deszcz". W 2002, na nowo otworzyły jej się drzwi
do sławy dzięki roli w filmie "Saathiya", który odniósł wielki sukces. W 2003, zagrała główną rolę w Chalte Chalte u boku Shah Rukh Khana. 2004 był najznamienitszym rokiem w jej karierze. Role w „Hum Tum” i „Yuve”, zagwarantowały jej dwie nagrody Filmfare (dla najlepszej aktorki i najlepszej drugoplanowej roli kobiecej) co uczyniło ją pierwszą aktorką, która wygrała dwie główne nagrody w tym samym roku. Jej rola pakistańskiego prawnika w Veer i Zaarze również była darzona uznaniem i Rani zdobyła dzięki niej wiele nominacji do nagród. W 2005 zagrała główną rolę w czterech szeroko znanych filmach. „Bunty Aur Babli” „Bajirao Mastani”, „Black”, „Paheli”.
W 2005 roku również wygrała wszystkie główne nagrody za film Black. W 2006 roku Karan Johan dał jej główną rolę w filmie "Nigdy nie mów żegnaj" u boku Shah Rukh Khana co zagwarantowało jej status gwiazdy.

"Temptations 2004" był jej najbardziej udaną trasą koncertową, w którym dobrze sobie radziła występując z takimi gwiazdami jak Shah Rukh Khan, Saif Ali Khan, Preity Zinta, Arjun Rampal i Priyanka Chopra.
Redaktorzy rubryk towarzyskich powiązali Rani z wieloma gwiazdami przemysłu ale ona ostro zaprzeczyła każdej jednej pogłosce romansu. Mukherjee wydaje się prowadzić pracowite życie, zupełnie skupia się na karierze. Pojawia się w wiadomościach
tylko dla pozorów, na premierach filmu, specjalnych wydarzeń, na festiwalach filmowych, filmowych uroczystości odnoszące się do awansu, albo na akcjach charytatywnych. Dom
ma dla niej duże znaczenie: w 2006, aktorka zakupiła nowy dom dla siebie w Juhu.